PH是“potential  Hydrogen”的縮寫，其計(jì)算方法；pH = -1g[H+]  ,它是表示溶液中H+的濃度指標(biāo)，反映溶液的酸堿性強(qiáng)弱。pH 值是人們通常用來(lái)衡量人體體液的酸堿度，pH值是溶液中親離子濃度指數(shù)的數(shù)值，一般在 0～14 之間，當(dāng) pH=7 時(shí)溶液為中性，pH<7 時(shí)為酸性，值越小酸性越強(qiáng)，pH>7 時(shí)為堿性，值越大，堿性越強(qiáng).

人體在正常生理狀態(tài)下，血液的pH值精確保持在 7.35～7.45 之間，為弱堿性，這個(gè) pH 值是人體細(xì)胞完成生理功能的最佳酸堿度，少一分或多一分都不行，人體酸堿平衡非常重要，如果低于7.45會(huì)發(fā)生酸中毒，pH 值下降 0.2，機(jī)體的輸氧量就會(huì)減少 69.4% 造成整個(gè)機(jī)體組織缺氧。高于 7.45 會(huì)堿中毒，如果嚴(yán)重會(huì)有生命危險(xiǎn)。

人體的一切生命活動(dòng)都需要酶的催化，（酶使人體所進(jìn)食的食物得到消化和吸收，并且維持內(nèi)臟所有功能，包括：細(xì)胞修復(fù)，消炎排毒，新陳代謝，提高免疫力，產(chǎn)生能量，而pH值對(duì)酶的活性有重要的影響。人體各部分要保持生理與結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，就必須保持穩(wěn)定的 pH 值。

 BCECF, AM 是一種可以穿透細(xì)胞膜檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)pH的熒 光染料。BCECF, AM沒(méi)有熒光，進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的 酯酶剪切形成BCECF，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。BCECF在適當(dāng) 的pH值條件下可以被激發(fā)形成綠色熒光。最大激發(fā)波長(zhǎng)和 發(fā)射波長(zhǎng)因pH的不同而有所不同，最大激發(fā)波長(zhǎng)在503 nm 左右，最大發(fā)射波長(zhǎng)在520 nm左右，實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的 激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為535 nm。

BCECF, AM 不僅被廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的研究，也用于動(dòng)物組織、植物細(xì)胞、細(xì)菌和酵母等的體內(nèi) pH 水平檢 測(cè)。此外，在細(xì)胞內(nèi)有pH變化的細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞粘附、藥物抵抗、細(xì)胞趨化等過(guò)程中 BCECF, AM 也被廣泛應(yīng)用。

活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）是機(jī)體進(jìn)行正常有氧代謝的產(chǎn)物，是由氧組成，含氧并且性質(zhì)活潑的一類物質(zhì)的總稱。包含超氧陰離子（O2-）、過(guò)氧化氫（H2O2）、羥自由基（OH-）、臭氧（O3）和單線態(tài)氧（1O2）等，由于它們含有不成對(duì)的電子，因此具有很高的化學(xué)反應(yīng)活性。

H2DCFDA 是活性氧族的細(xì)胞滲透性指示劑，可在細(xì)胞內(nèi)的酯酶發(fā)生氧化反應(yīng)去除其乙酸基團(tuán)之前保持非熒光性。在氧化環(huán)境中，H2DCFDA 轉(zhuǎn)變成發(fā)出綠色熒光的 2,7-二氯二氫熒光素。

Dihydroethidium（Hydroethidine）是常用的 DNA 染料溴化乙錠的還原形式，它可以檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)的氧化活性，也可以檢測(cè)吞噬細(xì)胞的“呼吸爆發(fā)”。Dihydroethidium 本身在細(xì)胞中具有藍(lán)色熒光（Ex/Em:355/420 nm），當(dāng)它進(jìn)入細(xì)胞中，脫氫后會(huì)成為氧化形式的乙錠，當(dāng)與 DNA 嵌合時(shí)，氧化形式的乙錠會(huì)發(fā)出紅色熒光（Ex/Em:518/605 nm）。

二氫乙錠(Dihydroethidium, DHE)，可自由透過(guò)活細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的ROS氧化，形成氧化乙錠；氧化乙錠可摻入染色體DNA中，產(chǎn)生紅色熒光。根據(jù)活細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生，可以判斷細(xì)胞ROS含量的多少和變化。二氫乙錠在細(xì)胞內(nèi)主要被超氧陰離子型ROS氧化，用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種快速簡(jiǎn)便的組織或培養(yǎng)活細(xì)胞中ROS經(jīng)典檢測(cè)方法。

DCFH-DA（二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯）本身無(wú)熒光，可自由透過(guò)活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 無(wú)熒光且不能通透細(xì)胞膜，從而被細(xì)胞內(nèi)的活性氧氧化生成有熒光的 DCF。根據(jù)活細(xì)胞中熒光的產(chǎn)生，可以判斷細(xì)胞活性氧的含量和變化。用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種經(jīng)典的組織或活細(xì)胞中活性氧檢測(cè)方法。

許多生物分子都具有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，但一氧化氮只包含兩個(gè)原子——一個(gè)氮原子和一個(gè)氧原子，雖然一氧化氮是這樣簡(jiǎn)單的分子，但在我們身體內(nèi)產(chǎn)生巨大的影響,具有許多重要的生物學(xué)功能。

一氧化氮檢測(cè)試劑盒（Nitric Oxide Assay Kit）是一種靈敏簡(jiǎn)單的檢測(cè)一氧化氮的試劑盒。生物機(jī)體內(nèi)有三種一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase, NOS）。一氧化氮合酶催化 L-精氨酸產(chǎn)生一氧化氮，發(fā)揮復(fù)雜的生理功能。一氧化氮產(chǎn)生之后，會(huì)被迅速代謝為硝酸鹽和亞硝酸鹽，本試劑盒利用經(jīng)典的 Griess 試劑對(duì)亞硝酸鹽 進(jìn)行定量測(cè)定來(lái)間接測(cè)定細(xì)胞釋放的一氧化氮。本試劑盒以亞硝酸鈉為標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)線性范圍為 3.12-200 μM，靈敏度≤3.12 μM。本試劑盒能夠檢測(cè)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)上清和血漿中的一氧化氮。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)是所有細(xì)胞中都存在的一種輔酶，包括NAD+(氧化型)和NADH(還原型)兩種形式。NAD+既是氧化還原反應(yīng)過(guò)程中傳遞電子的輔酶，又可以作為很多酶的底物來(lái)參與細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADP)是很多氧化還原反應(yīng)的輔酶，包括NADP+(氧化型)和NADPH(還原型)兩種形式。NADP+也參與到生物合成反應(yīng)中，比如脂質(zhì)和核酸的合成。傳統(tǒng)的NAD+/NADH和NADP+/NADPH測(cè)定是通過(guò)檢測(cè)340 nm處的吸收來(lái)完成的，該方法靈敏度低且易受干擾。

NAD/NADH、NADP/NADPH檢測(cè)試劑盒都是基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過(guò)比色法來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中NAD+(氧化型輔酶Ⅰ)和NADH(還原型輔酶Ⅰ)、NADP+(氧化型輔酶Ⅱ)和NADPH(還原型輔酶Ⅱ)各自的量、比值和總量的檢測(cè)試劑盒。試劑盒的特異性強(qiáng)。在反應(yīng)過(guò)程中NAD+被還原為NADH，NADH將WST-8還原成橙黃色formazan（甲臜），在450 nm左右有最大吸收峰/在反應(yīng)過(guò)程中NADP+被還原為NADPH，NADPH將WST-8還原成橙黃色formazan（甲臜），在450 nm左右有最大吸收峰。靈敏度高可檢測(cè)0.1 μM-10 μM NAD+或NADH/ NADP+或NADPH。